초음파 세포 분쇄기를 사용하여 세포 조각화를 통해 엽록소를 추출하기 위한 특정 단계
Feb 20, 2024
초음파 세포 분쇄기는 액체 내 초음파의 분산 효과를 활용하여 캐비테이션을 생성하여 액체 속의 고체 입자나 세포 조직을 파괴합니다.
생물학 산업의 발전으로 인해 시료 온도 측정 및 제어, 저온 냉각 시료 및 전체 기계의 지능 수준 향상 등과 같은 초음파 세포 분쇄기를 사용한 실험에 대한 요구 사항이 높아졌습니다.
초음파 세포 분쇄기를 사용한 초음파 세포 분쇄를 통해 엽록소를 추출하는 구체적인 단계:
1. 물 샘플을 원심분리 또는 여과하고 흡입 필터에 아세테이트 섬유 필터 멤브레인을 설치합니다. 여과를 위해 정량적인 양의 물 샘플을 붓고, 여과 중 부압은 너무 높지 않아야 합니다(약 50kPa). 물 샘플을 채취한 후 필터막의 수분을 줄이기 위해 1-2분 동안 계속해서 채취합니다. 1-2일 동안 단기 보관이 필요한 경우에는 일반 냉장고에 냉동보관하시면 됩니다. 장기간(30일) 보관이 필요한 경우에는 저온냉장고(-20도)에 보관하세요.
2. 식물성 플랑크톤이 들어있는 여과막을 꺼내어 냉장고에 넣어 저온에서 6-8시간 동안 건조시켜주세요. 가위로 작은 조각으로 잘라서 5ml 또는 10ml 원심분리용 튜브에 담습니다. 90% 아세톤 3-4 ml를 추가하여 조각을 액체 수준 아래로 담그십시오. 조각을 초음파 용기에 넣고 초음파를 사용하여 시료의 세포를 파괴합니다. (통일된 방법에 대한 * 단편화 시간 및 빈도 식별을 용이하게 하기 위해 서로 다른 시간 및 빈도에서 실험을 비교)
3. 세포분열된 시료를 초음파를 이용하여 원심분리기(3000-4000r/min)를 이용하여 10분간 원심분리한다. 상청액을 5ml 또는 10ml 용량 플라스크에 붓습니다. 90% 아세톤에 5ml 또는 10ml로 희석하고 잘 흔들어주세요.
4. 상청액을 분광광도계에 놓고 1cm 광로 비색 접시를 사용하여 각각 750nm, 663nm, 645nm 및 630nm 파장의 흡광도 값을 읽습니다. 샘플의 흡광도를 수정하려면 90% 아세톤을 공백 흡광도 측정으로 사용하십시오.
